一、关于持续做好抗菌药物临床应用管理有关工作的通知

¨ 加快建设多学科抗菌药物管理和诊疗团队

n 逐步转变抗菌药物临床应用管理模式，从“以行政部门干预为主”转变为“以多学科专业协作管理为主”

n 持续完善多学科诊疗体系。加强感染性疾病科、临床微生物学、临床药学和医院感染控制等学科建设

n 充分发挥临床微生物检验在多学科抗菌药物管理中的作用

¨ 加强儿童等重点人群抗菌药物临床应用管理

加强监测和评价--建立儿童门急诊和住院抗菌药物使用监控制度，重点监控呼吸道、肠道疾病的抗菌药物使用--提高儿童感染性疾病诊疗能力和水平

二、《中国儿童肺炎支原体感染实验室诊断规范和临床实践专家共识（2019年）》形成

三、肺炎支原体感染的临床部分

肺炎支原体肺炎（Mycoplasma pneumoniae pneumonia，MPP）

1. MPP诊断依据—临床与放射学无特异性，无法依赖

¨ 临床征象对识别儿童肺炎支原体肺炎的意义不大

虽然发热、咳嗽、喘息、（湿）罗音、胸痛和头痛，以及胸腔积液、肺实变和肺气肿等胸部X片征象可以提示肺炎支原体感染的可能性，但其中任一临床征象的存在或缺失都不能作为肯定或否定肺炎支原体感染的识别依据

¨ 胸部X线片所见无特异性

2. RMPP和SMPP—不要混淆

¨ 儿童难治性MPP（refractory mycoplasma pneumoniae pneumonia, RMPP）

《2013儿童CAP管理指南》定义：MPP经大环内酯类抗菌药物正规治疗7d或以上者仍无效，表明MPP对常规治疗的疗效反应不佳。可表现为持续发热、有中毒症状、胸部影像学病变范围在扩大、常有肺外并发症。

¨ 重症MPP（sever MPP, SMPP）

指MPP病情的严重程度。SMPP者可表现为一般情况差、有拒食或脱水征、有意识障碍、肺部浸润呈多肺叶或≥2/3的一侧肺受累、呼吸频率明显增快/紫绀/呼吸困难/乃至呼吸衰竭、ARDS，有中度以上胸膜腔积液、有低氧血症以及有肺外并发症等，具备上述表现之一者可判定为SMPP。

¨ SMPP表明肺炎病情严重，SMPP者可以是RMPP，但SMPP并不等同RMPP。

四、肺炎支原体感染的实验室检测

（一）肺炎支原体的体外培养

肺炎支原体（MP）液体培养只能是筛查，不能确诊。如果液体培养基有液体的改变，要转接种到固体培养基上，通过传代接种，最后得到支原体的菌落，这时候才能确诊。

（二）肺炎支原体抗体检测

1. MPP诊断现有的实验室检查—有缺陷

¨ 外周血白细胞计数和分类、CRP、PCT无特异性，关键是难以得出一个判断的折点标准

¨ 支原体培养分离是诊断的金标准，但需要使用到液体培养-固体培养基，技术要求高、耗时长，无早期诊断价值。

¨ 目前临床诊断MP感染最常用MP-IgM，还有IgA、IgG。检测方法有CFT、IFA、ELISA、EIA

Ø 颗粒凝集法（PA）测定MP抗体，确诊MP急性感染则应强调双份血清（间隔2周）恢复期抗体滴度上升4倍或下降至原来的1/4或MP-IgM抗体滴度持续＞1：160。

2. MP抗体结果分析

定性检测是初筛

¨ MP-IgM：是感染以后出现的早期抗体，感染后4-5d出现，2-3周达到高峰，续1-3个月甚至更长。免疫缺陷者、免疫功能发育不完善者（婴幼儿），可能出现假阴性或低滴度的抗体

¨ MP-IgG：感染后14d左右出现，第5-6周浓度达到峰值，具有较长（6个月以上）的维持时间，常适宜流行病学调研。所谓“4倍滴度升高或滴度下降到原来1/4”主要指的是MP-IgG

¨ 胶体金法检测MP-IgM是初筛，如检测结果与临床状况不符，建议采用静脉血方法进行复检

¨ 各种抗体检测试剂盒生产厂家和检测方法不同，判断的阳性结果值有所差异。需进行检测性能评估

3. IgM抗体早期诊断的重要临意义

¨ IgM抗体是体液免疫中最早出现的抗体，是近期感染的标志

¨ IgM抗体适用于初次感染及再次感染的早期诊断

感染后最早出现的血清抗体为IgM，通常在发病后1周内可在患儿血清内检测到特异性的IgM抗体

4. MP呼吸道感染实验室检测建议

¨ 胶体金法抗体检测应该成为门急诊快速筛查的首选方法。颗粒凝集法、ELISA和化学发光法可作为补充检测手段

¨ 有条件的医院应当采用MP-DNA/RNA检测，并进一步摸索拷贝数大小的临界值，用于住院病例，作为评估疗效依据

¨ 有条件的医院应当充分重视固体培养法的实验室管理路径的规范，用于住院病例，对研究MP的耐药问题具有重要意义

¨ MP-IgM检测适用无免疫缺陷、6月龄以上尤2岁以上

MP-IgG检测阳性仅提示得过MP感染，不反映感染的现状，抗体维持阳性的时间尚需要临床进一步验证

5. 常用IgM抗体检测方法

6. MP-IgM胶体金法是定性初筛

胶体金法（阳性定标：MP-IgM ≥ 1：160）可作为MP感染的门诊快速检测定性技术

颗粒凝集法（PA法）：可作为诊断MP近期感染的定量技术，尤其送双份血清

阳性支持诊断，阴性不能排除诊断，临床高度怀疑，那么应该从胶体金定性的方法转变为定量的方法，来进行检测。

7. 颗粒凝集法（PA）

（1）Serodia Myco Ⅱ的操作步骤

（2）Serodia Myco Ⅱ的结果判读

（三）肺炎支原体核酸检测

1. MP感染的PCR检测

¨ PCR检测MP感染：敏感性78~92%，特异性92~100%，1~2d内确诊

¨ 标本来源：痰液、BAL、咽拭、咽喉吸出物、血清

¨ 靶序列：MP特异性144bp序列，P1粘附基因、16srRNA基因、ATP酶操纵子/延伸因子基因

¨ 方法学：PCR（10⁷/ml拷贝）、套式PCR（nPCR）、RT-PCR（10⁴/ml拷贝）、qRT-PCR（痰液、咽喉吸出物10³/ml拷贝，咽拭500/ml拷贝）、多重PCR（multiplex PCR，同时检测MP、CP、LP……）

2. MP-DNA和RNA检测方法学比较

（四）MP感染前后各标志物含量变化

RNA检测比DNA更适用于感染性项目临床诊断和用药疗效评估

中国目前实际：确诊MP急性感染

Ø 应强调双份血清（间隔2周）恢复期抗体滴度上升4倍或下降至原来的1/4

Ø 或单份血清MP-IgM抗体滴度持续＞1：160

Ø 据条件，可选用RT-PCR检测乃至MP-RNA（SAT）